Therapeutic Approach of the Anterior Ocular Surface. Evaluation with In Vivo Confocal Microscopy // Терапевтичен подход към предна очна повърхност – проследяване с in vivo конфокална микроскопия

Abstract

Нашата цел бе разработването на прототип на медицинско изделие за лесно и безопасно приложение на стволови клетки в стандартна хирургия на предната очна повърхност, за да постигнем микроструктурна интеграция и да опишем промените в роговицата чрез IVCM. МЕТОДИ: Разработи се биопродуктът Alloheal, произведен от алогенни култивирани лимбални епителни стволови клетки, върху криоконсервирана и термолизирана АМ. За оценка на хирургически приемлив начин за трансфер и удобството при манипулиране се сравни специално конструирано, гъвкаво устройство за фиксиране на Alloheal с предлагани в търговската мрежа пръстеновидни устройства. Чрез IVCM се извърши сравнение на микроструктурно ниво на пациенти с тежки нарушения на предната очната повърхност преди и след прилагането на Alloheal спрямо прилагането на AM. РЕЗУЛТАТИ: Въпреки по-трудоемката подготовка за адаптиране на AM към гъвкавото устройство в сравнение с използването на твърд пръстен, се установиха по-добри условия за култивиране, транспортиране и най-вече за хирургично приложение. Гъвкавостта и възможността за лесна манипулация намаляват оперативното време, спомагат за добра адаптация на биопродукта без гънки и с намален риск от травмиране на клетките и очната повърхност. Вземайки под внимание важността на намаленото хирургично време, по-дългата подготовка на продукта бе оправдана. Alloheal доведе до възстановяване на дебелината на роговицата и по този начин стимулира реепителизацията и стабилизирането на епитела. В сравнение с класическата трансплантация на АМ се установи по-голямо увеличение на средната плътност на повърхностните клетки и на базалния епител. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: С поглед към бъдещето биопродукти като Alloheal са нов обещаващ терапевтичен подход за лечение на тежките нарушения на предната очната повърхност, въпреки, че ще са необходими допълнителни изследвания.

We aimed to develop and utilize the current novel biological therapies forming a prototype of a medical device for easy and safe application to achieve microstructural integration and describe corneal changes by IVCM. METHODS: Bioproduct Alloheal was manufactured by cultivated allogenic limbal epithelial stem cells on cryopreserved, denuded AM. These were mounted within a self-customized flexible device and on a commercially available insert ring to compare surgical handling. Patients with significant ocular surface disintegration before and after applying Alloheal and AMT were compared at the microstructural level with IVCM.RESULTS: The flexible prototype device for mounting the human amniotic membrane, provided despite the more time-consuming preparation, better requirements for cultivation, transportation, and improved surgical handling with decreased surgery time resulting in rapid transplantation of a wrinkle-free bioproduct with decreased risk of trauma to the cells and/or to the ocular surface. Alloheal transplant resulted in a regain in corneal thickness and thus promoting reepithelization and stabilization of the epithelium. A more significant increase in average superficial - and basal epithelial cell density was observed compared to classic AMT. CONCLUSION: In our hands, Alloheal® is a safe, effective method, clinically meaningful and a novel promising therapeutic approach for future managing complex anterior surface disorders where classic AMT.